[摘要] 目的 通过比较经不同浓度大蒜汁浸泡含旋毛虫肌幼虫的肉块对小鼠感染力的影响，来评估大蒜汁对旋毛虫幼虫的杀灭效果。 方法 30只昆明小鼠分为5组，喂食经不同浓度的大蒜汁（浓度分别为100.00%、50.00%、25.00%、12.50%）和生理盐水浸泡半小时含有旋毛虫肌幼虫的肉，饲喂30d后剖杀小鼠，观察和计数肌幼虫数。 结果 小鼠饲喂经100.00%、50.00%、25.00%、12.50%浓度大蒜汁和生理盐水浸泡半小时含有旋毛虫肌幼虫的肉后，在单位肌肉中检出旋毛虫肌幼虫数为0条、10条、60条、140条和235条。 结论 含旋毛虫肌幼虫的肉经一定浓度的大蒜汁浸泡后其旋毛虫肌幼虫的感染力会降低。
[关键词] 旋毛虫肌幼虫；不同浓度的大蒜汁；杀灭效果
[中图分类号] R532.14 [文献标识码] A [文章编号] 2095-0616（2014）07-28-03
Kill effect of different concentrations of garlic juice on Trichinella spiralis muscle larva
LUO Hui1 ZHANG Yun1 XIAO Mingyang1 RAO Yonggeng1 ZHANG Li2
1.School of Public Health，Dali University，Dali 671000，China； 2.Department of Parasitology Institute of Basic Medical， Dali University， Dali 671000， China
[Abstract] Objective By comparing the different concentrations of garlic juice soak meat containing trichinella spiralis muscle larva influence on mice"s appeal， to assess the garlic juice on the killing effect of trichinella spiralis larvae. Methods Kunming mice were divided into 5 groups， only 30 fed by different concentrations of garlic juice concentration （100.00%， 50.00%， 25.00%， 12.50% respectively） and normal saline containing trichinella spiralis muscle larva soak for half an hour of meat， feeding profile control after 30 d kill mice， observation and counting muscle larvae. Results The mice fed by 100%， 50.00%， 25.00%， 12.50% concentration of garlic juice， and normal saline containing trichinella spiralis muscle larva soak for half an hour after meat， detection of trichinella spiralis muscle in muscle larvae number is 0， 10， 60， 140 and 235. Conclusion The infectivity of Trichinella spiralis muscle larvae was decreased after the treatment of certain concentrations with garlic juice.
[Key words] Trichinella spiralis muscle larva； Different concentrations of garlic juice； Kill effect
旋毛虫病是一种严重危害人类健康的食源性寄生虫病，感染后可在宿主体内长期寄生，表现为发热、眼睑或面部水肿、过敏性皮疹、肌肉酸痛、无力等，重者丧失劳动能力。症状可持续数周，重度感染者可因心肌炎、肺炎或脑炎等而导致死亡。人体感染主要是因生食或半生食含幼虫囊包的猪肉及肉制品引起。旋毛虫病呈世界性分布，据报道[1]已有66个国家或地区有旋毛虫病流行，2004～2005年间全世界发生了147起旋毛虫病暴发[2]，自1964以来，我国共发生581起旋毛虫病暴发[3]，该病已成为影响我国食品安全和人民健康的重要食源性寄生虫病之一。
旋毛虫病的暴发流行与饮食习惯有着密切的
关系。云南省是一个多少数民族的省份，同时也是我国旋毛虫病的主要流行区之一，地域分布多集中在大理、德宏、临沧、西双版纳等地[4]。“生皮”“剁生”“过桥米线”等在少数民族中较为盛行，白族、傣族等居民本身又有生食或半生食肉类和肉制品的饮食习俗，这就造成了旋毛虫病的暴发和流行一直未得到有效控制[5-7]。由于地方饮食习惯、旅游业的发展及流动人口增多的原因，云南省大理州是旋毛虫病的高发区。2004年、2005年云南大理市喜洲镇、2007年凤仪镇分别发生食源性旋毛虫感染[8-10]。
现代医学证实，大蒜具有抗细菌、抗真菌、抗病毒、抗肿瘤等多种作用[11]。为此，本实验通过对居民常用调料品——大蒜汁浸泡一定时间含有旋毛虫幼虫的肉对小鼠的感染力进行分析，以为防治旋毛虫病提供一定的实验数据。
1 材料与方法
1.1 旋毛虫虫种、实验动物及大蒜的来源
旋毛虫为大理株旋毛虫虫种[ISS535，ISS 编号是已鉴定的旋毛虫隔离株在国际旋毛虫保种中心（International trichinella reference centre，ITRC）的注册编号]，由大理学院寄生虫学教研室的昆明大鼠传代保种，30只4周龄昆明小鼠（全部雄性）购自大理学院实验动物中心。白皮丫蒜两市斤，购自大理市泰兴市场，去皮后用榨汁机榨出大蒜汁备用。
1.2 配制不同浓度的大蒜汁
100.00%大蒜汁为10mL的大蒜汁原液；50.00%的大蒜汁为5mL大蒜汁原液加上5mL生理盐水；25.00%的大蒜汁为2.5mL大蒜汁原液加上7.5mL生理盐水；12.50%的大蒜汁为1.25mL大蒜汁原液加上8.75mL生理盐水。
1.3 含旋毛虫肌幼虫肉块的处理
将保种旋毛虫的昆明大鼠引颈处死，剥皮后除去内脏和脂肪，先取米粒样大小的膈肌压片镜检，观察并计数旋毛虫幼虫数量（约25条）。分别将米粒样大小肉块用四种不同浓度（100.00%、50.00%、25.00%、12.50%）的大蒜汁和生理盐水（含0.9% NaCl）浸泡半小时后备用。
1.4 实验动物分组
把30只昆明小鼠随机分为 5组，每组6只。第1～4组分别饲喂四种不同浓度（100.00%、50.00%、25.00%、12.50%）的大蒜汁，第5组饲喂生理盐水（含0.9% NaCl）浸泡半小时后的肉块，每只小鼠饲喂4块含旋毛虫肌幼虫（约100条幼虫）的肉块。
1.5 大蒜汁对旋毛虫肌幼虫的杀灭效果
小鼠饲喂30d后，引颈处死，每只小鼠完整取下膈肌，称重，用肌肉组织压片法分别查找每只小鼠的膈肌肌肉内旋毛虫幼虫数，再算出同一组小鼠单位膈肌肌肉中含旋毛虫幼虫数。
1.6 统计学分析
分别将小鼠喂食不同浓度大蒜汁处理相同时间的肉后单位膈肌检出旋毛虫数与相同条件生理盐水对照组相比较，求出方差分析值（F值）。若F值大于F界值（5.99），可认为处理因素有作用。
2 结果
小鼠感染经4种不同浓度（100.00%、50.00%、25.00%、12.50%）大蒜汁浸泡半小时的肉后30d，其膈肌检获虫数与同一时间的生理盐水对照组相比，其结果表明，小鼠感染经四种不同浓度的大蒜汁浸泡的肉后，其旋毛虫幼虫数均低于生理盐水对照组，并且浓度越高的大蒜汁浸泡的肉块喂食的小鼠后其检出旋毛虫的数量越少（表1）；经方差分析发现，F=61.958，P<0.001，有统计学意义，说明经大蒜汁处理后的含旋毛虫幼虫肉对小鼠的感染力有一定的抑制作用。
表1 小鼠饲喂不同浓度大蒜汁处理肉后单位膈肌重量旋毛虫幼虫数
项目大蒜汁处理组浓度（%）生理盐水对照组
100.0050.0025.0012.50
膈肌重量（g） 0.5010.6890.6320.6790.736
旋毛虫幼虫数/0.1g01060140235
3 讨论
大蒜是百合科葱属植物蒜（ALLitim.Sativinl）的地下鳞茎。作为生活中常用的调料之一，其主要生物活性成分——大蒜素具有消炎、降压、降血脂、抑制血小板积聚、减少冠状动脉硬化、抑制体内N-亚硝胺合成、防癌、治癌、抗病毒等多种功效[12]。诸多的实验证明，大蒜具有抑制或杀灭寄生虫的功效。有资料报道[13-14]，大蒜籽和大蒜油能较好的杀灭日本血吸虫尾蚴的作用。大蒜素治疗经口感染弓形虫速殖子小鼠，能提高黏膜（特别是消化道黏膜）SIgA抗体含量，保护机体抵御病原体感染[15]。大蒜素通过提高机体免疫功能来发挥对免疫抑制合并隐孢子虫感染小鼠的治疗作用[16]。用不同浓度大蒜素处理处于对数生长期的卡氏棘阿米巴发现[17]，随着浓度的增加，体外培养卡氏棘阿米巴生长有明显的抑制和杀伤作用，且与剂量呈正相关。我们研究结果表明，含旋毛虫肌幼虫的肉经大蒜汁处理后，肉中旋毛虫幼虫的感染力有一定的抑制作用，并随着大蒜汁浓度的增高，旋毛虫幼虫对小鼠的感染力也就越低。初步推断，含旋毛虫肌幼虫的肉经一定浓度的大蒜汁浸泡后其旋毛虫肌幼虫的感染力会降低。
但也有学者研究发现，大蒜原汁对卫氏并殖吸虫囊蚴具有刺激和轻度杀灭作用[18]，但短时间内（20min内）没有杀灭作用；大蒜素对弓形虫的生长无抑制作用[19]。为此，大蒜汁对旋毛虫感染力的抑制效果还需进一步深入研究，其他一些不可避免的外在因素（如大蒜的种类，浸泡时间，感染源虫株的毒力，感染数量，宿主免疫力等）也对其有一定的影响力。重要的是加强肉类检疫工作，改变不良的饮食习惯，不生食或半生食猪肉或其他动物肉类或肉制品，以防止感染。
[参考文献]
[1] Pozio E.World distribution of Trichinella spp. infections in animals and humans[J].Vet Parasitol，2007，149（1-2）：3-21.
[2] Dupouy-Camet J. Presidential address of ICT12 Conference： “Trichinella and trichinellosis-A never ending story”[J].Vet Parasitol，2009，159（3-4）：194-196.
[3] Cui J，Wang ZQ，Kennedy MW.The re-emergence of trichinellosis in China[J].Trends Parasitol，2006，22（2）：54-55.
[4] 刘翔，杨利萍，白桦，等.云南地区旋毛虫病致死9例的分布及病理学特点分析[J].法医学杂志，2013，29（1）：28-30.
[5] 崔晶，王中全.我国旋毛虫病的流行趋势与防制对策[J].中国寄生虫学与寄生虫病杂志，2005，23（5增刊）：344-348， 354.
[6] 林金祥.食源性寄生虫病流行趋势与控制策略[J].海峡预防医学杂志，2006，12（4）：1-3.
[7] 张玺，王中全，王书伟，等.食用醋或酱油对旋毛虫肌幼虫感染性和生殖力的影响[J].中国寄生虫学与寄生虫病杂志，2010，28（1）：34-37.
[8] 张丽兰，王庆新，刘继政，等.大理市一群体食源性旋毛虫感染报道[J].医学动物防制，2007，23（5）：352.
[9] 包爱萍.一起旋毛虫病暴发流行的特征分析[J].中外健康文摘，2010，7（18）：125-126.
[10] 马桂洋.大理州一起急性旋毛虫病暴发感染报告[J].寄生虫病与感染性疾病，2008，6（1）：55-56.
[11] 宋红萍，陈冠容.大蒜素的药理及临床新用[J].中国社区医师，2007，23（342）：9-10.
[12] 余功富.大蒜与大蒜素的主要功能及在畜禽生产中的应用[J].浙江畜牧兽医，2013，38（5）：15-17.
[13] 边藏丽，张万明，夏鹏，等.大蒜籽浸液预防日本血吸虫尾蚴感染的实验研究[J].长江大学学报（自然科学版），2009，6（3）：1-2，10.
[14] 杜幼芹，汪鋆植，冯天艳，等.大蒜油杀灭日本血吸虫尾蚴作用研究[J].中国病原生物学杂志，2011，6（9）：666-667.
[15] 苑文英.大蒜素对弓形虫感染小鼠黏膜免疫应答的影响[J].北京中医药大学学报，2010，33（1）：47-50.
[16] 张珍，郭立东，耿丽，等.大蒜素对免疫抑制合并隐孢子虫感染小鼠的治疗与免疫功能的作用观察[J].时珍国医国药，2009，20（3）：718-719.
[17] 王月华，郑善子，李顺玉， 等.大蒜素体外对卡氏棘阿米巴超微结构的影响[J].中国寄生虫学与寄生虫病杂志，2008，26（2）：156-157.
[18] 倪李佳，刘洁，沈浩贤，等.大蒜对离体卫氏并殖吸虫囊蚴杀灭作用的研究[J].热带医学杂志，2012，12（8）：933-935.
[19] 杨秋林，许丽芳，桂庆军，等.红霉素、阿奇霉素、磺胺嘧啶、大蒜素体外抗弓形虫作用的研究[J].南华大学学报（医学版），2007，35（1）：27-30.
（收稿日期：2014-02-07）